一個生活在布魯克林的平凡青年麥爾斯(Miles)發現自己擁有不尋常力量,正於徬徨之際,意外身亡的蜘蛛俠彼得柏加(Peter Parker) 突然現身話要教他做守護城市的蜘蛛俠。這時,麥爾斯才洞悉到原來這宇宙並不只有一個蜘蛛俠,過程中他更認識了來自其他次元、同樣擁有超凡力量的桂恩史德西 (Gwen Stacy) 、暗影蜘蛛俠(Spider-Man Noir)、佩妮柏加(Peni Parker)及蜘豬俠(Spider-Ham) 。那邊廂,大壞蛋金霸王(Kingpin)再度作惡,眼見家園即將被摧毀,麥爾斯決定奮力一戰,與其他伙伴「聯俠出動」, 拯救蜘蛛宇宙!